Всем известное hemilum светлячков происходит в результате биохимической реакции окисления светлячкового люциферина кислородом воздуха в присутствии аденозинтрифосфорной кислоты (ATP
):
E + LH2 + ATP
®
E-LH2-AMP + PP E-LH2-AMP P*-E-AMP
®
E + P + AMP + фотон |
Здесь AMP
- аденозинмонофосфат, PP
- пирофосфат, E
- люцифераза, LH2- люциферин, P*
и P
- продукт реакции (оксилюциферин) в возбужденном и основном состояниях, соответственно.
В отсутствие АТФбиолюминесценция не наблюдается; на этом основан один из самых чувствительных методов анализа АТФ
в различных объектах. Для определения содержания АТФсмотрят хемилюминесценцию в изучаемом растворе, к которому добавляют смесь люциферина и люциферазы, выделенных из светлячков либо полученных синтетически и методом генной инженерии.
Удается определять содержание АТФ
в образце от 10-17 моля и выше.
Поскольку биосинтез АТФ
— показатель нормальной жизнедеятельности клеток, препарат люциферин — люцифераза светляка используют для обнаружения бактериального заражения в какой-либо среде, оценки жизнеспособности эритроцитов при консервировании крови, изучения действия на микроорганизмы антибиотиков и т В последнее время используют препараты иммобилизованной люциферазы (т. е. фермента, молекулы которого химически связаны с полимерной пленкой), стабильность которой выше; такой препарат можно использовать многократно.
|